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紫外分光光度測定碳酸氫鹽透析液的醋酸含量

人工透析液一般用于腎功能衰竭或中毒患者體外血液透析用，是一類含有多種離子物質(zhì)的溶液，具有一定的滲透壓，通過人工腎透析膜裝置起著排除體內(nèi)代謝物、體內(nèi)毒素或過量藥物及調(diào)節(jié)體液的水-電解質(zhì)平衡等作用。

根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的中華人民共和國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《血液透析及相關(guān)治療用濃縮物》YY0598附錄A中的要求，透析液中的醋酸鈉（醋酸根）含量的測定采用液相色譜法，即選用陰離子排阻WESCAN#269-006色譜柱，用0.015mol/L的硫酸水溶液做流動相，檢測波長220nm，外標(biāo)法測定量。也有資料介紹采用離子交換法測定，但此法操作費時繁瑣。購買液相色譜需增加資金投入，因此我們嘗試采用公司現(xiàn)有的儀器紫外分光光度計UV1901PC對透析液中的醋酸根含量進(jìn)行檢測。

   我們查閱了大量的資料以尋找這方面的相關(guān)報導(dǎo)。我們參照資料介紹的方法制定了試驗方案，并進(jìn)行了一系列的探索試驗，得到了較為滿意的結(jié)果。

1試驗

試驗儀器

UV1901PC雙光束紫外可見分光光度計、分析天平、容量瓶、移液管等。

試驗藥品

氯化鈉、氯化jia、氯化鈣、碳酸氫鈉、冰醋酸等符合《中華人民共和國藥典》2005版二部相關(guān)要求；氯化鎂符合國家藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-1001-（HD-0476）-2002有關(guān)規(guī)定；醋酸鈉合國家藥品監(jiān)督管理局國家藥品標(biāo)準(zhǔn)WS-1001-（HD-0584）-2002有關(guān)規(guī)定。

1.3 選取測定波長試驗

1.3.1醋酸特征波長試驗：用移液管量取適量的醋酸溶液加蒸餾水配制成3.8mol/L醋酸水溶液，以蒸餾水做空白，在190-900nm下掃描，沒有大吸收峰。

1.3.2 醋酸鈉特征波長試驗：稱取一定量的醋酸鈉，用蒸餾水配置成6g/L的水溶液，以蒸餾水做空白，在190-1100Nm之間掃描，發(fā)現(xiàn)在220nm處有一大吸收峰。

干擾因素的觀察：將上述藥品按表2透析液組分的配方制成透析液，不加醋酸和碳酸氫鈉，以蒸餾水做空白，在190-1100nm波長范圍內(nèi)掃描，在197nm處有一大吸收峰，在220nm處吸收值很小。

檢測波長的確定：從上述2.3.1,2.3.2,2.3.3試驗可知，選取220nm測定波長適合。這是因為：1醋酸在190-1100Nm沒有大吸收峰，無法直接測定；2、在透析液中有碳酸氫鈉存在，能與醋酸起化學(xué)反應(yīng)生成醋酸鈉，所以只要測定醋酸鈉的含量就可這算成醋酸（根）含量；3、在220nm處透析液其它組分吸收值很小，對醋酸鈉含量的測定不產(chǎn)生干擾。

1.4 供試液的制備

1.4.1濃縮液的配制：為使配制的供試液均勻、重復(fù)性好且誤差小，我們將配方中含量較少的組分先制備成濃縮液，然后再按比例稀釋成透析液。

1.4.2 透析液制備：按透析液的配方，以配制1000ml透析液計算，各組分加入量。

1.4.3標(biāo)準(zhǔn)曲線供試液的制備：以表2配方為基礎(chǔ)，改變醋酸濃縮液的加入量，制成一系列醋酸濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.5標(biāo)準(zhǔn)曲線

將表3醋酸濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)液在220nm用UV1901PC紫外可見分光光度計的比色槽以蒸餾水做空白分別測試各溶液的吸光度值，每個濃度平行測試3次。

1.5.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：以醋酸鈉濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度平均值為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.5.2 線性回歸方程制作：將表4數(shù)據(jù)作線性回歸，得到回歸方程：

C=119.56A-2.39mmol/L 式中 C----醋酸鈉含量，mmol/L

A------吸光度值。

1.5.3 線性相關(guān)檢驗：將線性回歸數(shù)據(jù)作線性回歸檢驗，得到可決系數(shù)R2為1.003，相關(guān)系數(shù)等于1.0，由此可見，醋酸鈉含量與吸光度值*線性相關(guān)。

供試樣品的測試

取費森尤斯碳酸氫鈉透析粉，按使用說明配制成透析液，在220nm波長處用UV1901PC紫外可見分光光度計的比色槽以蒸餾水做空白直接測定溶液的吸光度，將吸光度數(shù)據(jù)代入回歸方程可計算出溶液中醋酸鈉的含量，或者從標(biāo)準(zhǔn)曲線上直接查得測試結(jié)果，以此計算出透析液中的醋酸含量。

1.6.1 費森尤斯透析液的配制：產(chǎn)品分為A、B兩種干粉。按產(chǎn)品說明書要求的比例直接配制成1000ml透析液。

1.6.2 供試液醋酸鈉含量的測試：將表5制備的供試液在220nm波長處用UV1901PC紫外可見分光光度計的比色槽以蒸餾水做空白直接測定溶液的吸光度，將吸光度值代入回歸方程計算出透析液中的醋酸鈉含量，然后折算出溶液中醋酸的含量。

結(jié)論及討論

2.1試驗證明，用紫外可見分光光度計法替代液相色譜法測定透析液中的醋酸含量方法是可行的。因為費森尤斯碳酸氫鈉透析液中醋酸含量的標(biāo)示值為2.5~4.5mol/l，并且國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布的中華人民共和國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《血液透析及相關(guān)治療用濃縮物》網(wǎng)上征求意見稿中要求醋酸含量應(yīng)為標(biāo)示量的±10%，由結(jié)果可知，測定結(jié)果全部在標(biāo)示量范圍內(nèi)，且重復(fù)性良好。

紫外測定透析液中的醋酸含量試驗的標(biāo)準(zhǔn)曲線制作不能選擇不加醋酸的透析液作為空白溶液，必須用配制透析液的蒸餾水（或透析用水）做空白。從表4可以看出，未加入醋酸的透析液其吸光度測定結(jié)果偏離標(biāo)準(zhǔn)曲線，這是因為，加入醋酸的透析液的溶液組成發(fā)生了改變，醋酸與溶液中一部分碳酸氫鈉發(fā)生了化學(xué)反應(yīng)生成了醋酸鈉，使溶液中碳酸氫鈉濃度江都，溶液特征發(fā)生變化，導(dǎo)致溶液吸光度產(chǎn)生偏離。因此，用配制透析液的蒸餾水或透析用水作空白是實驗的正確選擇，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中能明顯看出這一點。